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ITRAQ蛋白檢測

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ITRAQ蛋白檢測(Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)即等重標簽標記用于蛋白質(zhì)相對和定量技術(shù)。它是美國Applied Biosystems公司研發(fā)的蛋白質(zhì)組定量技術(shù)?;鶢栴D生物主營實驗技術(shù)服務(wù)、動物模型構(gòu)建服務(wù)等。

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ITRAQ蛋白檢測Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation)即等重標簽標記用于蛋白質(zhì)相對和定量技術(shù)。它是美國Applied Biosystems公司研發(fā)的蛋白質(zhì)組定量技術(shù)。基爾頓生物主營實驗技術(shù)服務(wù)、動物模型構(gòu)建服務(wù)等。

ITRAQ蛋白檢測簡單介紹:蛋白質(zhì)組分析(proteomics) 是對生物蛋白組(proteome) 的分析與檢測,蛋白組分析首先要將混合蛋白質(zhì)分離, 分離的主要方法是蛋白雙向電泳。已被分離的蛋白質(zhì)由質(zhì)譜分析對其進行鑒定。
ITRAQ蛋白檢測的4種同位素標記試劑由4種相對分子質(zhì)量分別為114、115、116和117的報告基團(reporter group),相對分子質(zhì)量分別為31、30、29 和28 的質(zhì)量平衡基團(balance group)以及一個相同的肽反應(yīng)標記試劑基團(peptide reactive group)組成。不同的報告基團分別與相應(yīng)的平衡基團相配后,相對分子質(zhì)量均為145,即等量異位標簽(isobaric tag)。
    將蛋白質(zhì)裂解為肽段,然后用iTRAQ試劑進行差異標記。由于iTRAQ試劑是等量的,即不同同位素在標記同一多肽后在*級質(zhì)譜檢測,分子量*相同,用串聯(lián)質(zhì)譜方法對在*級質(zhì)譜檢測到前體離子(precursor ion)進行碰撞誘導解離,產(chǎn)物離子通過第二級質(zhì)譜進行分析。在二級質(zhì)譜分析過程中,報告基團、質(zhì)量平衡基團和多肽反應(yīng)基團之間的鍵斷裂,質(zhì)量平衡基團丟失,產(chǎn)生低質(zhì)荷比(m/z)的報告離子。由于二級質(zhì)譜可分析相對分子質(zhì)量相差1的報告基團,不同報告基團離子強度的差異就代表了它所標記的多肽的相對豐度。同時,多肽內(nèi)的酰胺鍵斷裂,形成一系列b 離子和y 離子,得到離子片段的質(zhì)量數(shù),通過數(shù)據(jù)庫查詢和比較,可以鑒定出相應(yīng)的蛋白質(zhì)前體.

ITRAQ蛋白檢測實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR

8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

9.SCI論文:SCI論文評估建議、SCI論文設(shè)計咨詢、SCI論文統(tǒng)計資料處理、SCI論文實驗操作咨詢、SCI論文編修翻譯等。

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