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iTRAQ實驗外包服務

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iTRAQ實驗外包服務背景簡介:iTRAQ和TMT的技術原理*一樣,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標簽的質量數(shù)差異,通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質進行相對定量。

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背景簡介:iTRAQ和TMT的技術原理*一樣,所不同的是二者的分子結構有差異。與SILAC相比(標記蛋白質),iTRAQ和TMT是對肽段進行標記的。依據(jù)iTRAQ/TMT標簽的質量數(shù)差異,通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質進行相對定量:SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質進行定量,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進行定量的;iTRAQ/TMT幾乎能兼容所有來源的蛋白質樣品,并且能同時分析多達8-10組的樣品,分析通量高。

iTRAQ實驗外包服務

 

iTRAQ實驗外包服務流程

1、分別提取蛋白質并定量;

2、Trypsin分別對蛋白進行酶解,提取肽段;

3、用不同質量數(shù)的iTRAQ/TMT標簽分別對肽段樣品進行標記:

4、標記完成后,混合樣品,用SCX進行組分分離(15-20組分);

5、對每個組分進行LC-MS分析:     

6、蛋白質鑒定與定量分析,篩選差異表達的蛋白;            

7、生物學實驗驗證(Western blot,EUSA等)。                          

 

目前,基爾頓生物主營實驗技術服務,歡迎廣大科研愛好者前來咨詢!


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