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Phos-tag * Phos-tag Biotin 用于磷酸化蛋白質的免疫印跡分析，使用*標記的Phos-tag 進行化學發(fā)光檢測。Phos-tag BTL-104和BTL-105為PVDF膜上的磷酸化蛋白檢測提供了一種敏感的方法。該方法需要用到鏈霉親和素標記的辣根（HRP）和化學法官檢測試劑。貨號：301-93531 BTL-104；308-93541 BTL-105；308-9720
Phos-tag™ * Phos-tag™ Biotin
磷酸化蛋白質的免疫印跡分析
- 使用*標記的Phos-tag™ 進行化學發(fā)光檢測
Phos-tag™ BTL-104和BTL-105為PVDF膜上的磷酸化蛋白檢測提供了一種敏感的方法。該方法需要用到鏈霉親和素標記的辣根(HRP)和化學法官檢測試劑。
Phos-tag™ Biotin
Phos-tag™*用于免疫印跡分析的原理
Phos-tag Biotin的特點：
■ 對磷酸化蛋白的檢測極其靈敏 Phos-tag特異性結合與氨基酸基序列無關
■ 可適用于下游的抗體探針和質譜分析等
■ 操作過程與常規(guī)使用辣根標記抗體檢測近似
Phos-tag™ Biotin應用：
（一）在PVDF 膜上檢測磷酸化蛋白
可精確檢測轉印在PVDF膜上的磷酸化蛋白至ng級水平，未檢測到相應的去磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白的斑點。 |
摘自Eiji Kinoshita ,et al., Mol.Cel.Proteomics (2006) 5: 749
Phos-tag™ Biotin使用注意事項：
1. 在10μL溶劑E的Phos-tag BTL相對于1μL溶劑G的鏈霉親和素標記辣根氧化酶而言，大大地過量。使用更小量 Phos-tag BTL (例如1μL 溶劑E) 和溶劑 G (1μL) 得到同樣的結果. 用戶可以調整溶劑E的體積以獲得同樣的靈敏度或者節(jié)省經(jīng)費。如果溶劑E的體積減少，不需要調整zinc(II) 溶液的量(溶劑 F)。 按規(guī)范使用買了的磷酸化蛋白和鏈霉親和素標記辣根氧化酶(GE Healthcare Bio-Sciences)，可以觀測到BTL-104和BTL-105在檢測效率上存在細微差別（由于間隔效應）。
2. 如果膜沒有在溶劑C中*浸潤，背景信號就會升高并形成斑點。更嚴重的是，無法觀測到蛋白質信號。請確認膜不會排斥溶劑C。
3. 強烈建議使用PVDF膜用于Phos-tag™ BTL方法。
Phos-tag™瓊脂糖 Phos-tag™ Agarose 相關產(chǎn)品
貨號 | 廠商編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
301-93531 | BTL-104 | Phos-tag Biotin BTL-104 Phos-tag * | 10 mg |
308-93541 | BTL-105 | Phos-tag Biotin BTL-105 Phos-tag * | 10 mg |
308-97201 | BTL-111S1 | Phos-tag™ Biotin BTL-111 1 mM Aqueous Solution | 0.1 ml |
考慮到更佳的溶解度，**次使用時，試用Phos-tag Biotin BTL-104。
可以觀測到BTL-104和BTL-105在檢測效率上存在細微差別（由于間隔效應）。
BTL-111S1擁有更長的親水性間隔, 因此比BTL-104有更高的靈敏度。
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相關資料
分析磷酸化蛋白的新方法 - WAKO 磷酸化蛋白電泳試劑Phos-tag 系列
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