Western Blot Stripping Buffer
Western Blot一抗二抗洗脫液
Western Blot一抗二抗洗脫液可以對(duì)同一張膜進(jìn)行多次Western Blot檢測(cè)。在室溫條件下,將用過(guò)的膜浸泡在一抗二抗洗脫液10-60分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后可使用不同的抗體進(jìn)行下一輪Western Blot實(shí)驗(yàn),因而可利用同一張膜進(jìn)行多次蛋白檢測(cè),適用于少量樣品多次檢測(cè)不同的蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏,采用這一方法多次檢測(cè)同一張膜上的蛋白,大大節(jié)約時(shí)間,而且可以消除重新上樣帶來(lái)的誤差。產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本產(chǎn)品主要成分為Tris-Hcl緩沖液,SDS和β-巰基乙醇。
使用方法:
1、將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的Western Blot一抗二抗洗脫液中,室溫洗脫10-20分鐘,時(shí)間長(zhǎng)短請(qǐng)參考后面的說(shuō)明進(jìn)行優(yōu)化,部分抗體的洗脫可能需較長(zhǎng)時(shí)間,更有60分鐘之久。
2、取出膜,用TBST漂洗兩次,每次10分鐘。
3、此時(shí)膜上抗體已除去,可再加入另一種抗體。
注意事項(xiàng):
1、Western Blot一抗二抗洗脫液是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來(lái),但實(shí)際操作中,膜類(lèi)型、抗體類(lèi)型、濃度及抗原特性都影響洗脫難易程度。
2、確定洗脫時(shí)間:Western Blot一抗二抗洗脫液洗脫幾分鐘后,可加入ECL顯色液顯影,如膠片上顯示條帶,表明抗體未除凈,需進(jìn)一步洗脫或浸泡至膠片無(wú)顯色。
3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA封閉的膜更容易再生,所以盡可能的用脫脂奶粉封閉。
4、盡量避免讓膜干燥。
5、本產(chǎn)品在低溫下易出現(xiàn)白色絮狀沉淀,是正?,F(xiàn)象,請(qǐng)37℃復(fù)溫后使用。如果復(fù)溫后絮狀沉淀仍然存在請(qǐng)勿使用。
6、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
保存條件:
4℃保存,1年有效。