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W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮

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W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮細胞特征:每周換液兩三次。細胞應當在融合前傳代。
質(zhì)量控制:本細胞經(jīng)過了檢測,不含有細菌、真菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體。

詳細信息 在線詢價

W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁生長活性強

 DMEM-H: Dulbecco’s Modified Eagle’s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  胎牛血清,10%消化3-5分鐘。1:3。3天內(nèi)可長滿。*培養(yǎng)基+8%DMSO公司細胞的簡潔信息:

(1)儲存:液氮。

(2)運輸:干冰。

(3)用途:只可用于科研。

(4)第二代培養(yǎng)末期液氮凍存。

(5)W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮ATCC每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。

(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

收到W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮ATCC后的處理:

1)收到細胞后,首先觀察瓶身是否完好(注意有無縫隙,裂痕)。

2)顯微鏡下觀察細胞的生長狀況,有無細胞漂浮。

3)用新潔爾滅消毒瓶口及瓶身。

4)打開瓶口,再次用新潔爾滅消毒瓶口(可能會有液體溢出,注意不要碰到液體),酒精燈烤瓶口消毒。

5)將培養(yǎng)液轉(zhuǎn)移至50ml離心管或廣口瓶中(若細胞漂浮嚴重,離心培養(yǎng)基,1000g*5分鐘,將離心后的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至另一個大離心管中,留一點吹打細胞沉淀成懸液,回收細胞至原培養(yǎng)瓶),若漂浮不嚴重,亦離心一下。

6)在原培養(yǎng)瓶中留一部分原裝培養(yǎng)液,再補加自己新配的培養(yǎng)基至適當容積,例如4ml,讓細胞適應一下環(huán)境。  當細胞長到70-80%,凍存大部分,小部分傳代。

RS1990    PANC-1     人胰腺癌細胞    詢價    ATCC
RS2000    PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]     雜交瘤細胞CD25    詢價    ATCC
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RS2190    RF/6A     猴脈絡膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細胞    詢價    ATCC0294-1G    碘硝基四唑紫    高純級    1G    146-68-9    5 years    IODONITROTETRAZOLIUM CHLORIDE (INT)
0294-500MG    碘硝基四唑紫    高純級    500MG    146-68-9    5 years    IODONITROTETRAZOLIUM CHLORIDE (INT)
0298-50G    阿利新藍 8 GX    高純級    50G    33864-99-2    4 years    ALCIAN BLUE 8 GX
0298-100G    阿利新藍 8 GX    高純級    100G    33864-99-2    4 years    ALCIAN BLUE 8 GX
H102-1000ML            1000ML            
H131-201            201            
0302-1G    亞麻酸    超純級    1G    463-40-1    5 years    LINOLENIC ACID
0302-5G    亞麻酸    超純級    5G    463-40-1    5 years    LINOLENIC ACID
0304-5G    硫酸*    組織培養(yǎng)級    5G    1405-41-0    2 years    GENTAMYCIN SULFATE
0304-10G    硫酸*    組織培養(yǎng)級    10G    1405-41-0    2 years    GENTAMYCIN SULFATE
0305-1KG    碳酸銨    ACS級    1KG    506-87-6    4 years    AMMONIUM CARBONATE & MIXTURE
0325-50G    腺苷    高純級    50G    58-61-7    2 years    ADENOSINE
0325-100G    腺苷    高純級    100G    58-61-7    2 years    ADENOSINE
0326-1KG    草酸,二水    高純級    1KG    6153-56-6    4 years    OXALIC ACID, DIHYDRATE
0326-500G    草酸,二水    高純級    500G    6153-56-6    4 years    OXALIC ACID, DIHYDRATE
K296-5G            5G            
K296-100G            100G            
0329-1G    氯化硝基四氮唑藍    超純級    1G    298-83-9    2 years    NBT
0329-500MG    氯化硝基四氮唑藍    超純級    500MG    298-83-9    2 years    NBT
0329-5G    氯化硝基四氮唑藍    超純級                NBT
0330-500G    硫酸銅,五水    ACS級    500G    7758-99-8    4 years    CUPRIC SULFATE, PENTAHYDRATE

產(chǎn)品名稱:W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮ATCC

細胞術(shù)檢測樣品制備方法

A.W632細胞小鼠B細胞雜交瘤細胞貼壁懸浮ATCC直接標記抗體(FITC標記抗體)

(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4以上冷PBS洗一次。

(2) 4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min

(3) 1ml5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。

(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。[2]

B. 未標記抗體間接免疫熒光標記法:

(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。

(2)2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;

(3)1ml0.2%Triton-X1005%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min

(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結(jié)合一抗,重復一次。

(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。

(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。

(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。

C.細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:

(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。

(2)4預冷的70%冷乙醇固定,4保存 ,至少固定18小時。

(3)調(diào)整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37孵育30分鐘即可進行流式分析。

(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。


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