丰满人妻被公侵犯完整版,黑人巨茎大战欧美白妇,日韩 欧美 亚洲 一区,亚洲成AV人在线观看网址

　　凝膠電泳儀通常用于分析用途，但也可以作為制備技術(shù)，在采用某些方法（如質(zhì)譜(MS)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)、克隆技術(shù)、DNA測序或者免疫印跡）檢測之前部分提純分子。
　　
　　一、使用方法
　　
　　該技術(shù)操作簡便快速，可以分辨用其它方法（如密度梯度離心法）所無法分離的DNA片段。當(dāng)用低濃度的熒光嵌入染料溴化乙啶(Ethidiumbromide,EB)染色,在紫外光下至少可以檢出1-10ng的DNA條帶,從而可以確定DNA片段在凝膠中的位置。此外,還可以從電泳后的凝膠中回收特定的DNA條帶,用于以后的克隆技術(shù)操作。
　　
　　二、產(chǎn)品應(yīng)用
　　
　　凝膠電泳被廣泛用于分子生物學(xué)、遺傳學(xué)和生物化學(xué)：1.大的DNA或者RNA分子通常利用瓊脂糖凝膠電泳（agarose gel electrophoresis）分離，也可以使用聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）。2.蛋白質(zhì)的凝膠電泳通常在加入十二烷基硫酸鈉的聚丙烯酰胺凝膠中進行（SDS-PAGE），或者非變性凝膠電泳，或二維電泳。SDS-PAGE蛋白質(zhì)凝膠電泳圖。3.毛細(xì)管電泳。4.酶譜法（zymography）。5.變性梯度膠凝電泳（Denaturing Gradient Gel Electrophoresis，DGGE）。瓊脂糖和聚丙烯酰胺可以制成各種形狀、大小和孔隙度。瓊脂糖凝膠分離DNA片度大小范圍較廣,不同濃度瓊脂糖凝膠可分離長度從200bp至近50kb的DNA片段。瓊脂糖通常用水平裝置在強度和方向恒定的電場下電泳。聚丙烯酰胺分離小片段DNA(5-500bp)效果較好,其分辯力*,甚至相差1bp的DNA片段就能分開。聚丙烯酰胺凝膠電泳很快,可容納相對大量的DNA,但制備和操作比瓊脂糖凝膠困難。聚丙烯酰胺凝膠采用垂直裝置進行電泳。目前,一般實驗室多用瓊脂糖水平平板凝膠電泳裝置進行DNA電泳。
　　
　　瓊脂糖主要在DNA制備電泳中作為一種固體支持基質(zhì),其密度取決于瓊脂糖的濃度。在電場中,在中性pH值下帶負(fù)電荷的DNA向陽極遷移,其遷移速率由下列多種因素決定:
　　
　　1、DNA的分子大小：線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數(shù)成反比，分子越大則所受阻力越大，也越難于在凝膠孔隙中蠕行，因而遷移得越慢。
　　
　　2、瓊脂糖濃度
　　
　　一個給定大小的線狀DNA分子,其遷移速度在不同濃度的瓊脂糖凝膠中各不相同。DNA電泳遷移率的對數(shù)與凝膠濃度成線性關(guān)系。凝膠濃度的選擇取決于DNA分子的大小。分離小于0.5kb的DNA片段所需膠濃度是1.2-1.5%,分離大于10kb的DNA分子所需膠濃度為0.3-0.7%,DNA片段大小間于兩者之間則所需膠濃度為0.8-1.0%。
　　
　　3、DNA分子的構(gòu)象
　　
　　DNA分子處于不同構(gòu)象時,它在電場中移動距離不僅和分子量有關(guān),還和它本身構(gòu)象有關(guān)。相同分子量的線狀、開環(huán)和超螺旋DNA在瓊脂糖凝膠中移動速度是不一樣的,超螺旋DNA移動zui快,而開環(huán)雙鏈DNA移動zui慢。如在電泳鑒定質(zhì)粒純度時發(fā)現(xiàn)凝膠上有數(shù)條DNA帶難以確定是質(zhì)粒DNA不同構(gòu)象引起還是因為含有其他DNA引起時,可從瓊脂糖凝膠上將DNA帶逐個回收,用同一種限制性內(nèi)切酶分別水解,然后電泳,如在凝膠上出現(xiàn)相同的DNA圖譜,則為同一種DNA。
　　
　　三、維護與保養(yǎng)
　　
　　電泳儀通電進入工作狀態(tài)后，禁止人體接觸電極、電泳儀電泳物及其它可能帶電部分，也不能到電泳儀電泳槽內(nèi)取放東西，如需要應(yīng)先斷電，以免觸電。同時要求電泳儀必須有良好接地端，以防漏電。
　　
　　電泳儀通電后，不要臨時增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭，以防短路現(xiàn)象發(fā)生，雖然電泳儀內(nèi)部附設(shè)有保險絲，但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致電泳儀損壞。
　　
　　由于電泳儀不同介質(zhì)支持物的電阻值不同，電泳儀電泳時所通過的電流量也不同，其電泳儀泳動速度及泳至終點所需時間也不同，故電泳儀不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時在同一電泳儀上進行。
　　
　　在總電流不超過電泳儀額定電流時(zui大電流范圍)，可以多槽關(guān)聯(lián)使用，但要注意不能超載，否則容易影響電泳儀壽命。
　　
　　某些特殊情況下需檢查電泳儀電泳輸入情況時，允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開機，但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開機，否則電壓表指針將大幅度跳動，容易造成不必要的人為電泳儀損壞。
　　
　　使用過程中發(fā)現(xiàn)電泳儀異?，F(xiàn)象，如較大噪音、放電或異常氣味，須立即切斷電泳儀電源，進行檢修，以免發(fā)生意外事故。