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關(guān)于色譜儀緩沖液使用的一些基礎(chǔ)知識(shí)

   2019年02月26日 15:34  
  【中國儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】緩沖溶液指的是由弱酸及其鹽、弱堿及其鹽組成的混合溶液,能在一定程度上抵消、減輕外加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿對(duì)溶液酸堿度的影響,從而保持溶液的pH值相對(duì)穩(wěn)定,是色譜儀使用中非常重要的一部分。
 
  關(guān)于流動(dòng)相中緩沖鹽的正確使用方法,主要有兩部分。首先,使用前的處理。在使用緩沖鹽作流動(dòng)相之前需要用不含緩沖鹽的流動(dòng)相沖洗色譜柱,直至基線平穩(wěn)。 原則上,用于沖洗的流動(dòng)相與分析時(shí)所用的流動(dòng)相含水的比例相同(或含水更多),不同的只是用于沖洗用的流動(dòng)相中不含緩沖鹽。其實(shí),原因在于緩沖鹽通常易溶于水,難溶于有機(jī)溶劑。用含緩沖鹽的(特別是做流動(dòng)相的水為飽和的緩沖鹽溶液時(shí))流動(dòng)相進(jìn)行分析時(shí),如果分析前色譜柱中用于保存色譜柱的流動(dòng)相中含水的比例相對(duì)較小,不先沖洗掉,接下來做樣品的時(shí)候所用的流動(dòng)相中如果有機(jī)溶劑含量大,而其比例中所含的水又不足以溶解該緩沖鹽時(shí),緩沖鹽將會(huì)在色譜柱柱體上析出,沉積下來,對(duì)色譜柱造成損害。
 
  其次是使用后處理,用與分析時(shí)含水比例相同的流動(dòng)相進(jìn)行約30min沖洗,直至基線平穩(wěn)。如果該色譜柱在接下來很長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)不使用,要長(zhǎng)期保存,則需再加上一步,即用純的有機(jī)溶劑沖洗一遍,直至基線平穩(wěn)。
 
  此外,使用緩沖液時(shí)應(yīng)該注意一下幾點(diǎn):
 
  1、避免使用鹽酸鹽,鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用。
 
  2、緩沖液盡量要現(xiàn)配現(xiàn)用,往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,隔天或放置長(zhǎng)時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)有很多怪現(xiàn)象發(fā)生。
 
  3、實(shí)驗(yàn)后不可用有機(jī)溶劑直接過度,有機(jī)溶劑會(huì)處使鹽類析出,造成液路或色譜柱堵塞,可用95:5的水甲醇沖洗。
 
  4、使用緩沖液要及時(shí)掌握ph范圍,做到胸中有數(shù)。
 
  5、清洗液路和柱子時(shí),有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗。
 
  6、長(zhǎng)時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,若有白色鹽類析出,可考慮一定周期用10%硝酸沖洗一下液路(拆下柱子,走30ml,再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞。
 
  7、選擇緩沖液要用可靠的試劑,避免不純的鹽類造成不必要的麻煩。

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